定量生物学 > 亚细胞过程
[提交于 2025年2月18日
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标题: 基于快速抗生素抗性筛选的哺乳动物细胞CRISPR-Cas9基因编辑(FAB-CRISPR)
标题: Fast Antibiotic resistance-Based gene editing of mammalian cells with CRISPR-Cas9 (FAB-CRISPR)
摘要: 使用CRISPR-Cas9对蛋白质进行标记,可以在其天然环境中研究蛋白质功能,但受到低同源重组修复(HDR)效率的限制,导致敲入率低。 我们提出了一种详细的流程,使用包含抗生素抗性盒的HDR供体质粒,以快速选择基因编辑细胞。 我们的方案简化了在人细胞中N端或C端的标记,能够在单一克隆步骤中制备HDR供体质粒。
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